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“针刺五脏俞穴调五脏神”针法对失眠大鼠脑内细胞因子调节作用及其机制的研究
来源: [ 08-10-06 13:56:00 ] 作者:胡金凤 编辑:【摘要】 目的:观察针刺五脏俞穴对失眠大鼠脑内细胞因子的影响。方法:Wistar大鼠,雄性,体重180~220 g,40只随机分为4组,空白组:空白对照;模型组:腹腔注射PCPA;安定组:腹腔注射PCPA后,连续5个周期给予安定灌胃治疗;针刺组:腹腔注射PCPA后,连续5个周期给予针刺治疗。分别观察各组大鼠下丘脑内IL1、TNF含量的变化。结果:模型组脑内IL1、TNF含量明显降低,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。安定组脑内IL1、TNF含量均有明显升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。针刺组脑内IL1、TNF含量有明显升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:针刺五脏俞穴对失眠大鼠脑内细胞因子的影响显著,针刺五脏俞是治疗失眠症的一种有效方法。
【关键词】 失眠 针刺疗法 细胞因子 穴 背俞 大鼠
基金项目:吉林省科学技术厅课题(课题编号20050574) 失眠症中医称之不寐、不得卧,是临床常见病症之一,常因脏腑功能紊乱、气血亏虚、阴阳失调导致。持续失眠可影响自主神经系统、内分泌系统和免疫功能。白细胞介素1(IL1)和肿瘤坏死因子(TNF)是具有多种生物学功能的细胞因子,现已证明,IL1和TNF是参与睡眠的免疫调节中有代表性的细胞因子,内源性的IL1和TNF随着睡眠的变化而呈现节律性的含量改变,外源性的IL1和TNF则均可诱发动物睡眠[1]。笔者在总结导师东贵荣教授“调五脏神治疗失眠”经验的基础上[2],观察了“针刺五脏俞穴调五脏神”针法对失眠大鼠下丘脑内IL1和TNF含量的影响,进一步研究了“针刺五脏俞调五脏神”针法干预失眠的机制,为“调五脏神治疗失眠”学说提出实验依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 健康Wistar大鼠,雄性,体重180~220 g[长春高新动物实验中心提供,为普通级动物,许可证号:SCKE—(吉)2003]。在长春中医药大学第一附属医院新药研究开发实验室常温下饲养1周后用于实验。
1.2 动物分组 空白组不做任何处置,每日空抓,反映未做任何处置大鼠下丘脑内IL1、TNF的含量。模型组腹腔注射PCPA造模成功后,不作任何处理,反映大鼠治疗前下丘脑内IL1、TNF的水平。安定组腹腔注射PCPA后,给予安定灌胃治疗,观察造模后安定对大鼠下丘脑内IL1、TNF的影响。针刺组取肺俞(双)、心俞(双)、脾俞(双)、肾俞(双),观察针刺对失眠大鼠下丘脑内IL1β、TNF的影响。
2 实验方法
2.1 造模方法 采用PCPA腹腔注射的方法,临用前按大鼠450 mg/kg用量,用弱碱性生理盐水配置成混悬液备用。除空白组外,其余3组腹腔注射PCPA混悬液,连续注射2 d,空白组不做任何处理,于第1次腹腔注射28~30 h后,大鼠出现昼夜节律消失,白天夜晚活动不停,表示模型复制成功。
2.2 针刺疗法 参照华兴邦大鼠穴位图谱,于第3胸椎棘突下旁开7 mm取肺俞(双),于第5胸椎棘突下旁开7 mm取心俞(双),于第12胸椎棘突下旁开7 mm取脾俞(双),于第2腰椎棘突下旁开7 mm取肾俞(双)。
操作:常规消毒后,采用0.35 mm×20 mm不锈钢毫针,直刺6 mm,将Hj68051型经穴治疗仪,正极接肺俞的毫针,负极接肾俞的毫针,疏密波(8/80 Hz,疏密波转换14次/min,电压强度从1V随针刺时间和次数逐渐增加,保持局部轻微抖动为度,终强度为3V电流为1mA)。通电时间为10 min,留针20 min为一个针刺周期,连续重复5个针刺周期共计2.5 h,出针后0.5 h处死大鼠。
2.3 西药疗法 安定片,按成人催眠剂量10 mg/d,用大鼠给药剂量体表面积公式算出大鼠给药剂量为0.92 mg/kg,连续5 d给药后处死。
2.4 测定方法 用放射免疫检测法测定各组大鼠下丘脑内的IL1β、TNF的含量。
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