川芎嗪对大鼠肾脏缺血/再灌注损伤保护作用及抗细胞凋亡作用

　　　川芎嗪对大鼠肾脏缺血/再灌注损伤保护作用及抗细胞凋亡作用

　　来源： [ 08-10-13 09:50:00 ] 编辑：　　2.3肾组织细胞凋亡的变化各组肾组织细胞凋亡指数见表1，TUNEL检测肾组织凋亡细胞结果见图1.

　　A：对照组；B：缺血/再灌注（I/R）组；C：I/R造模后给予川芎嗪；D：I/R造模前给予川芎嗪.

　　图1 各组TUNEL免疫组化染色 SABC ×400（略）

　　2.4 Bcl2，Bax蛋白表达在TMPpre组肾小管上皮细胞中Bcl2表达明显，而Bax在I/R组肾小管上皮细胞中表达明显（图2，3）. Western Blot检测支持肾组织免疫组化染色的结果，采用灰度扫描显示Bcl2在TMPpre组表达最高，而Bax在I/R组表达最高（图4，5）.

　　3 讨论

　　

　　肾脏I/R损伤是休克、严重创伤及肾移植过程中一种常见的病理生理现象，可以导致急性肾衰竭（ARF）和移植肾功能丧失，在这一过程中最先受到损伤的细胞是肾小管上皮细胞. 研究表明［5］，肾脏I/R损伤后除发生细胞坏死外，细胞凋亡也是其重要的死亡形式. 细胞凋亡受多种凋亡相关基因及其蛋白的调控，Bcl2家族就是其中之一，对细胞凋亡起着重要的调控作用［6］. 大量的研究［7-8］证实缺血性ARF时存在肾脏细胞凋亡，本研究得出了相似的结果：I/R组肾功能损伤明显，凋亡细胞数量增多，提示肾脏细胞凋亡数量与肾功能损伤程度密切相关.

　　A：对照组；B：缺血/再灌注（I/R）组；C：I/R造模后给予川芎嗪；D：I/R造模前给予川芎嗪.

　　图2 各组Bcl2免疫组化染色 SABC ×400（略）

　　凋亡是缺血性损伤后细胞死亡的重要形式，细胞凋亡受多种凋亡相关基因及其蛋白的调控，与凋亡相关的基因通常分为抗凋亡基因和促凋亡基因. Bcl2是一种重要的抗凋亡基因蛋白，而Bax为Bcl2 家族成员，其作用则与Bcl2 相反，具有促凋亡作用. Reed［9］认为，Bcl2高表达或Bcl2/Bax比值升高可抑制Bax的活化，从而抑制细胞凋亡. 本研究结果显示，应用川芎嗪能使肾脏I/R过程中细胞凋亡指数下降，Bcl2蛋白表达增强，Bax 蛋白表达减弱，Bcl2/Bax比值增高. 表明川芎嗪能抑制肾脏I/R过程中肾脏细胞凋亡的发生，且川芎嗪的肾脏保护作用与抑制Bcl2/Bax介导的细胞凋亡密切相关，提示在肾脏I/R损伤中，细胞凋亡是可以预防的.

　　

　　大量的研究［10-11］证实川芎嗪对I/R损伤的肾脏有明显的保护作用. 本研究结果表明，肾脏I/R前后应用川芎嗪均具有肾脏保护作用，在I/R前给予川芎嗪效果更明显，表现在TMPpre组肾功能明显好转，肾小管上皮细胞超微结构损伤明显减轻. 我们推测：早期应用川芎嗪能在肾脏缺血期及再灌注早期对抗细胞损伤因子，稳定线粒体膜，从而更好地保护肾脏细胞，而晚期给药则难以在短期内缓解细胞已遭受的严重损伤.

　　A：对照组；B：缺血/再灌注（I/R）组；C：I/R造模后给予川芎嗪；D：I/R造模前给予川芎嗪.

　　图3 各组Bax的免疫组化染色 SABC ×400（略）

　　图4 Western Blot检测各组Bcl2和Bax蛋白表达（略）

　　

　　A：对照组；B：缺血/再灌注（I/R）组；C：I/R造模后给予川芎嗪；D：I/R造模前给予川芎嗪.

　　aP＜0.05，bP＜0.01 vs I/R组.

　　图5 各组Bcl2和Bax蛋白表达（略）

　　本研究可得出以下结论：肾脏I/R损伤时细胞凋亡数量增加，Bcl2和Bax 蛋白表达较正常增强，Bcl2/Bax比值下降，肾功能恶化. I/R前应用川芎嗪能减少肾脏细胞凋亡，上调Bcl2蛋白并同时下调Bax 蛋白的表达，明显改善肾功能. 因此，川芎嗪对肾脏I/R损伤，可通过调节Bcl2和Bax蛋白的表达，抑制细胞凋亡起到肾脏保护作用.

　　【参考文献】

　　　　［1］ Feng L, Xiong Y, Cheng F, et al. Effect of ligustrazine on ischemiareperfusion injury in murine kidney［J］. Transplant Proc, 2004, 36(7):1949-1951.

　　［2］王忠，翁国星，杜建. 川芎嗪对缺血再灌注肾保护作用的研究［J］. 福建中医学院学报，2005，15（2）：26-27.

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　　［7］ Saikumar P, Venkatachalam MA. Role of apoptosis in hypoxic/ischemic damage in the kidney［J］. Semin Nephrol, 2003, 23(6):511-521.

　　［8］谭华，王汉民，潘龙，等. 缺血预处理对大鼠急性肾缺血/再灌注损伤的保护作用及其对细胞凋亡的影响［J］. 第四军医大学学报，2004，25（9）：818-821.

　　［9］Reed JC. Proapoptotic multidomain Bcl2/Baxfamily proteins: mechanisms, physiological roles, and therapeutic opportunities［J］.Cell Death Differ, 2006, 13(8):1378-1386.

　　［10］ Sun L, Li Y, Shi L, et al. Protective effects of ligustrazine on ischemiareperfusion injury in rat kidneys［J］. Microsurgery, 2002, 22(8):343-346.

　　［11］王汉民，吴雄飞，谭华，等. 川芎嗪对缺血/再灌注损伤大鼠肾脏细胞凋亡及Bcl2和Bax表达的影响［J］. 第四军医大学学报，2006，27（20）：1884-1887.

　　

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