中药对去势大鼠神经内分泌免疫网络的影响

　　　中药对去势大鼠神经内分泌免疫网络的影响

　　来源： [ 08-10-17 13:36:00 ] 作者：肖炜编辑：【摘要】　　［目的］从神经-内分泌-免疫网络（RNEI-N）角度探讨补肾活血中药复方益妇宁软胶囊（YFN）改善更年期综合征（CS）的作用机制。［方法］采用大鼠去势复制CS动物模型，给药4周后，测定大鼠血清E2、FSH、LH、Te、P、IL2及下丘脑、垂体和血浆βEP水平；测定下丘脑5HT、5 5HIAA、NE及DA含量；检测子宫、脾脏和主动脉雌激素受体（ER）水平。［结果］YFN能升高去势大鼠血清E2、IL2水平，提高子宫、脾脏和主动脉ER水平，升高下丘脑、垂体和血浆βEP水平，降低下丘脑5HT和5HIAA水平，升高NE和DA的含量，降低5HT/NE、5HT/DA的比值。［结论］YFN通过调节生殖内分泌功能，改善植物神经功能紊乱，提高机体ER水平和免疫功能，能从多层次、多途径、多环节作用于更年期衰退的神经内分泌免疫网络，从而达到稳定机体内环境，缓解CS症状的作用。

　　【关键词】更年期综合征去势大鼠中药神经内分泌免疫网络

　　Abstract: ［Objective］To explore the therapeutic mechanisms of traditional Chinese medicine formula Yifuning soft capsules（YFN）which can nourish the kidney and activate blood on treating climacteric syndrome（CS）from neuroendocrine immune network（NEIN）.［Method］We established the models of climacteric syndrome with ovariectomized（OVX）rats. After giving drugs 4 weeks，we detected serum sex hormone（E2，P，Te，FSH，LH），interleukin2（IL2）and hypothalamic，pituitary and plasma βendorphin（βEP）levels. The hypothalamic monoamine transmitters （NE，DA，5HT，5HIAA）contents were detected. The estrogen receptor（ER）levels of uterus，spleen and artery were detected too. ［Result］YFN can improve levels of serum E2，IL2 and ER of uterus，spleen and artery in OVX rats. YFN can increase reduced hypothalamic，pituitary and plasma βEP levels in OVX rats. YFN can reduce contents of hypothalamic 5HT and 5HIAA，increase the levels of NE and DA in OVX rats and reduce the ratio of 5HT to NE and 5HT to DA in OVX rats. ［Conclusion］YFN may produce effects on declined NEIN in menopause from various levels，ways and links by means of regulating the function of plant nerve and reproduction endocrine and improving levels of ER and body immunity. So they can stabilize inner condition of body and relieve the syndrome of CS.

　　Key words: Climacteric syndrome；Ovariectomized rats；Traditional Chinese Medcine；Neuroendocrineimmune network

　　神经内分泌免疫网络（NEIN）与更年期综合征（Climacteric syndrome，CS）病理诸环节的关系十分密切，NEIN学说的提出，对认识CS发病及防治提供了新的思路。补肾活血中药复方益妇宁软胶囊（YFN）是治疗CS经验方，临床疗效确切［1］。本文建立CS大鼠模型，进一步从NEIN角度探讨YFN改善CS的作用机制，为其临床应用提供客观依据。

　　1 材料

　　1.1 实验动物

　　SD雌性大鼠，体重190～220g，南方医科大学（原第一军医大学）动物实验中心提供。

　　1.2 受试药品

　　YFN由南方医科大学中医系中药新药研究室提供，批号：20020608。已烯雌酚片（Diethylstilbestrol Tablets，DT），广东药学院制药厂生产，批号：20000309。

　　1.3 主要试剂

　　雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）及孕酮（P）放免试剂盒，拉尔文生物工程技术有限公司；白细胞介素2（IL2）放免试剂盒，北京邦定生物技术有限公司；βEP放免试剂盒，上海第二军医大学神经生物学教研室；5羟色胺（5HT）、5羟吲哚乙酸（5HIAA）、去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）标准品，sigma公司；3H雌二醇，放射比活性2.22TBq/mmol，New English Nuclear公司；17β雌二醇，Sigma公司。

　　1.4 主要仪器

　　SN682型放免γ计数器，上海核福光电仪器有限公司；RF5000荧光分光光度计，日本岛津公司；LS6500液体闪烁计数仪，Beckman公司；754型紫外可见光分光光度计，上海第三分析仪器厂。

　　2 方法

　　2.1 动物模型与分组

　　大鼠麻醉后，摘除两侧卵巢，通过去势制作CS大鼠模型。随机分为4组：正常对照组（手术暴露卵巢但不切除）、模型对照组、DT片、中药组，每组各10只。DT片用蒸馏水配成0.02g·L-1溶液；益妇宁软胶囊用1%吐温80配成混悬液，每毫升混悬液相当于原生药250mg。去势手术后9d始，用药各组按0.005ml·g-1灌服相应药液，连续4w。对照组灌服等容积生理盐水。

　　2.2 观察指标和测定方法

　　2.2.1 生殖内分泌激素和IL2测定

　　末次灌胃并禁食12h后，大鼠断头，取躯干血，分离血清，-20℃保存，用放免法测定E2，LH，FSH，T，P和IL2含量。另外，取3ml全血加入含有抗凝剂和抑肽酶的塑料试管中，混匀，离心，取上清，顺序饱和加样程序测定血浆βEP递质含量。

　　2.2.2 下丘脑神经递质测定

　　动物断头取脑后，部分取下丘脑第三脑室周围组织，称重，荧光分光光度法测定NE，DA，5HT及5HIAA含量。部分动物全脑，煮沸后分离所需下丘脑与垂体前后叶，称重后加入酸匀浆后，取上清，平衡饱和加样程序测定垂体、下丘脑βEP递质含量。

　　2.2.3 子宫及主动脉ER测定

　　子宫、主动脉和脾脏精确称重后，液氮冻存，放射配体结合分析法（HAP）测定ER。

　　2.3 统计学方法

　　统计方法为方差分析，结果采用SPSS10.0统计软件包处理。

　　

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